Les automates dans l'exploration fine d'anomalies des cellules sanguines et des réticulocytes

Le diagnostic des syndromes myélodysplasiques (SMD) est fondé sur l'analyse morphologique du sang périphérique et de la moelle osseuse, et sur le caryotype médullaire.

Les résultats préliminaires d'une étude utilisant ADVIA 120, présentée par le Dr G. Le Roux, suggèrent que des paramètres anormaux au niveau des cellules sanguines pourraient devenir des marqueurs pour détecter des signes précoces de myélodysplasie et pour le suivi de ces patients. Dans cette étude, qui a porté sur 12 patients ayant un SMD confirmé, dont 5 ayant des anomalies cytologiques mineures sur le myélogramme et une cytopénie réfractaire récente, plusieurs indicateurs de myélodysplasie ont été observés : l'activité peroxydasique (IMPX) qui est abaissée par rapport aux sangs de référence dans les SMD confirmés ainsi que dans les myélodysplasies mineures ; le coefficient de variation du volume des plaquettes (CV Plaq) qui est plus élevé dans les SMD que dans les sangs de référence ; pour les érythrocytes, le CV GR est plus élevé dans les SMD, le pourcentage de macrocytes hypochromes est supérieur, y compris dans les dysplasies mineures, et le pourcentage des réticulocytes à haute teneur en ARN est augmenté chez les patients ayant un SMD avéré.

Une formule érythrocytaire

Il convient de rappeler que l'analyse multiparamétrique des populations de réticulocytes et des globules rouges matures, qui peut être réalisée en cytométrie de flux par ADVIA 120, permet de fournir une « formule érythrocytaire » avec la quantification des cellules débordant des seuils de normalité des volumes (cellules microcytaires de V < 60 fl et macrocytaires de V > 120 fl) et de la concentration en hémoglobine (cellules hypochromes de CH < 28 g/dl et hyperdenses de CH > 41 g/dl). L'automate mesure aussi le nombre de réticulocytes et les répartit en trois classes en fonction de leur degré de maturité. L'ensemble de ces paramètres apporte une aide dans la démarche diagnostique et dans le suivi des patients atteints de la pathologie du globule rouge (correction de la carence martiale, traitement par l'hydroxyurée d'un patient drépanocytaire). Ainsi, l'effet du traitement peut être constaté au niveau des paramètres érythrocytaires, bien que peu de modifications apparaissent au niveau de la numération.

Drépanocytose

Comme l'explique le Dr M. Maier (hôpital Tenon), l'exploration de l'érythropoïèse repose sur la mise en œuvre de techniques longues et complexes, d'où l'idée d'évaluer l'apport de l'ADVIA 120 dans la drépanocytose, première maladie génétique en Ile-de-France. Il s'agit d'une maladie non seulement cellulaire, mais aussi rhéologique, pouvant être modulée par l'existence de l'alphathalassémie. On connaît l'extrême variabilité clinique et biologique de la drépanocytose, avec des formes très sévères et des formes bénignes (pour lesquelles le diagnostic va être posé à l'âge adulte), en considérant comme des déterminants importants de la sévérité clinique : le raccourcissement de la durée de vie des globules rouges et l'érythropoïèse de « stress » survenant en réponse à l'hémolyse. L'étude de l'équipe du Dr M. Maier a confirmé chez les sujets drépanocytaires la grande hétérogénéité cellulaire (pour le volume et la concentration en hémoglobine), caractérisant les réticulocytes et les globules rouges matures, alors que, chez les sujets sains, on n'observe pas différentes catégories de cellules débordant des seuils de normalité. en ce qui concerne les variations survenant au cours de la maturation réticulocytaire chez les sujets drépanocytaires, il y a un pourcentage élevé de cellules hyperdenses et de cellules immatures. Selon le Dr Maier, de très nombreux paramètres permettent une évaluation en temps réel de ce qui se passe au niveau de la maturation des globules rouges, donc, une meilleure caractérisation des phénotypes de patients et, peut-être, une possibilité de mettre en évidence des facteurs pronostiques.
De son côté, le Dr V. Eclache (Bondy) a précisé que les automates d'hématologie permettent certes le comptage des plaquettes fiable et reproductible. Toutefois, il ne faut pas oublier quelques pièges comme les problèmes des fausses thrombopénies en relation avec le prélèvement ou les pathologies pouvant interférer avec le comptage de la numération, à savoir : thromb-agglutination en présence de l'anticoagulant (EDTA), présence de globules rouges anormaux ou de plaquettes géantes ou encore des dysglobulinémies.

Deux nouveaux automates

Enfin, Bayer Diagnostics a complété sa gamme en hématologie par la mise à la disposition des professionnels de santé et des chercheurs de deux nouveaux automates. ADVIA 70, automate à numération formule complète d'excellente linéarité, possède comme atouts d'être peu encombrant et simple à utiliser (la formation est très rapide), avec un système permettant d'utiliser un petit échantillon (80 μl).
ADVIA S60 Etaleur-Colorateur est un appareil semi-automatique avec un nouveau concept - par rapport aux automates entièrement automatiques de taille importante - qui offre des avantages : l'automatisation de l'étalement et de la coloration des lames fondée sur la technique de Hematek, qui garantit la qualité et la standardisation des frottis, l'identification rigoureuse via le lecteur code à barres, la sécurité (pas de contact avec le sang).

D'après les communications des Drs G. Le Roux (Bobigny), M. Maier-Redelsperger (Paris) et V. Eclache-Saudreau (Bondy), lors du 9e Colloque d'hématologie organisé par Bayer Diagnostics.